Staining of a Gram-Positive Bacterium

This short animation demonstrates a gram stain of gram-positive bacterium. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.

(Russian translation by Ksenia Skrypnik, Russian Cancer Research Center)
В этой презентации рассказывается о том, как с помощью окрашивания по Граму можно идентифицировать грамположительные

и грамотрицательные бактерии, окрашивая специфические для этих бактерий

клеточные структуры.

Данная анимация является одним из двух в этой серии, в которой показано окрашивание грамположительных

бактерий. Структуры, расположенные на поверхности бактерий, изображены схематически.

В круге, расположенном в правом нижнем углу, можно будет наблюдать, как выглядят бактерии под микроскопом

во время каждого из этапов окрашивания.

До окрашивания бактерии прозрачны и их сложно разглядеть в микроскоп.

После термической фиксации мазка образец в течение минуты выдерживают в кристаллическом фиолетовом,

после чего промывают.

Кристаллический фиолетовый окрашивает бактериальную стенку в синий цвет

и бактерии становятся заметными под микроскопом.

Затем мазок выдерживают в растворе йода в течение минуты, после чего вновь промывают.

На этом этапе йод и кристаллический фиолетовый формируют комплекс,

расположенный внутри клеточной стенки.

На этом этапе под микроскопом будут заметны бактерии, окрашенные в темно-синий или черный цвет.

Мазок промывают обесцвечивающим раствором - спиртом или ацетоном.

Комплекс, образованный кристаллическим фиолетовым и йодом не вымывается из бактериальных стенок

и бактерии остаются окрашенными в темно-синий цвет.

Во время последней стадии окрашивания мазок погружают в нейтральный красный или сафранин на одну минуту,

после чего вновь промывают.

Несмотря на то, что этот краситель также окрашивает клеточную стенку, эта окраска незаметна,

так как доминирующим является темно-синий цвет.

Итак, благодаря многослойной клеточной стенке, грамположительные бактерии

после окрашивания становятся черными или темно-синими.