WEBVTT

00:00:03.000 --> 00:00:11.929
(Portuguese/ Português translation by Ana Julia Perrotti-Garcia, FFLCH USP SP, Freelance Translator & Interpreter)
[Música]

00:00:11.929 --> 00:00:21.000
Passo 1. Prepare o esfregaço

00:00:21.000 --> 00:00:28.038
Prepare o esfregaço: flambe a alça e colete o inóculo de uma cultura fresca.

00:00:28.038 --> 00:00:35.000
Depois de colocar uma gota de selante na lâmina.

00:00:35.000 --> 00:00:40.098
Colete parte do inóculo do centro da cultura.

00:00:40.098 --> 00:00:47.069
Umedeça o material coletado, unindo-o ao selante, sobre a lâmina

00:00:47.069 --> 00:00:54.099
fazendo um esfregaço de cerca de dois a três centímetros.

00:00:54.099 --> 00:00:59.000
Passo 2. Aqueça suavemente para fixar a lâmina (depois de secar ao ar).

00:00:59.000 --> 00:01:05.469
Após secar ao ar, aqueça para fixar o esfregaço, passando pela chama

00:01:05.469 --> 00:01:07.619
cerca de três ou quatro vezes.

00:01:07.619 --> 00:01:12.024
Esse procedimento mata os microorganismos.

00:01:12.024 --> 00:01:18.061
Fixando-os à lâmina e impede sua autólise,

00:01:18.061 --> 00:01:21.017
tornando os microorganismos permeáveis à coloração.

00:01:21.017 --> 00:01:25.003
Passo 3. Cobrir o esfregaço com cristal violeta

00:01:25.003 --> 00:01:36.000
Cubra o esfregaço com cristal violeta por um minuto.

00:01:36.000 --> 00:01:42.149
Deixe o corante agir por 60 segundos.

00:01:42.149 --> 00:01:58.000
Remova o excesso de cristal violeta e lave em água corrente, sem jatos fortes.

00:01:58.000 --> 00:02:05.063
Passo 4. Cobrir a lâmina com solução iodada de Lugol

00:02:05.063 --> 00:02:14.005
Cubra o esfregaço com solução de Lugol por um minuto.

00:02:14.005 --> 00:02:18.249
Deixe o corante agir por 60 segundos.

00:02:18.249 --> 00:02:22.999
Lavo excesso de lugol com água corrente, sem jatos fortes.

00:02:22.999 --> 00:02:31.057
Passo 5. Descoloração rápida com acetona.

00:02:31.057 --> 00:02:40.209
O esfregaço é descolorido com acetona por dez segundos.

00:02:40.209 --> 00:02:52.249
Remova o excesso de álcool e lave em água corrente, sem jatos fortes.

00:02:52.249 --> 00:02:58.319
Passo 6. Contra-coloração com vermelho neutro (ou safranina).

00:02:58.319 --> 00:03:03.919
Use vermelho neutro como contra-corante, por um minuto.

00:03:03.919 --> 00:03:07.939
Cubra o esfregaço com o vermelho neutro.

00:03:07.939 --> 00:03:14.609
Deixe o corante agir por 60 segundos.

00:03:14.609 --> 00:03:26.029
Remova o excesso de vermelho neutro em água corrente.

00:03:26.029 --> 00:03:31.639
Aplique papel filtro ou papel absorvente, para eliminar o excesso de umidade.

00:03:31.639 --> 00:03:36.000
Não esfregue.

00:03:36.000 --> 00:03:48.969
A lâmina está pronta para o exame microscópico em 100X (imersão em óleo).

00:03:48.969 --> 00:04:01.019
Coloque o óleo de imersão na lâmina corada.

00:04:01.019 --> 00:04:04.209
Monte a lâmina no microscópio.

00:04:04.209 --> 00:04:08.209
Estamos usando a objetiva para aumento 500X. Examine a lâmina.