[Script Info] Title: [Events] Format: Layer, Start, End, Style, Name, MarginL, MarginR, MarginV, Effect, Text Dialogue: 0,0:00:00.27,0:00:04.81,Default,,0000,0000,0000,,(Portuguese/Português translation by Ana Julia Perrotti-Garcia, FFLCH USP SP, Freelance Translator & Interpreter)\NUm ensaio de aglutinação é um modo simples de detectar e medir anticorpos Dialogue: 0,0:00:04.81,0:00:09.38,Default,,0000,0000,0000,,em uma amostra clínica, contra um antígeno específico. Dialogue: 0,0:00:09.38,0:00:15.02,Default,,0000,0000,0000,,Nesta animação serão demonstrados os princípios e as armadilhas potenciais do ensaio. Dialogue: 0,0:00:15.06,0:00:21.38,Default,,0000,0000,0000,,O principal reagente utilizado no ensaio é uma solução de pequenas pérolas insolúveis Dialogue: 0,0:00:21.38,0:00:22.83,Default,,0000,0000,0000,,geralmente compostas de látex. Dialogue: 0,0:00:22.83,0:00:28.16,Default,,0000,0000,0000,,Alternativamente, para medir anticorpos contra um agente patogênico microbiano pode-se usar Dialogue: 0,0:00:28.16,0:00:31.10,Default,,0000,0000,0000,,bactérias mortas ou células de levedura como partículas aglutinantes. Dialogue: 0,0:00:31.10,0:00:36.55,Default,,0000,0000,0000,,Mas, neste exemplo, usamos pérolas de látex, preparadas de modo a Dialogue: 0,0:00:36.55,0:00:41.87,Default,,0000,0000,0000,,serem revestidas pelo antígeno pesquisado e tenham uma concentração suficiente Dialogue: 0,0:00:41.87,0:00:45.71,Default,,0000,0000,0000,,para produzir uma suspensão leitosa visível. Dialogue: 0,0:00:45.71,0:00:49.63,Default,,0000,0000,0000,,Para medir anticorpos contra o antígeno, as partículas são adicionadas aos orifícios Dialogue: 0,0:00:49.63,0:00:55.02,Default,,0000,0000,0000,,de uma placa de microtitulação com 96 orifícios. Adiciona-se soro de diferentes pacientes Dialogue: 0,0:00:55.02,0:00:57.30,Default,,0000,0000,0000,,aos orifícios da primeira coluna. Dialogue: 0,0:00:57.30,0:01:02.98,Default,,0000,0000,0000,,Duas diluições dos soros são preparadas nas fileiras. Dialogue: 0,0:01:02.98,0:01:09.98,Default,,0000,0000,0000,,Então, adiciona-se soro de controle positivo e negativo nas últimas duas colunas. Dialogue: 0,0:01:12.06,0:01:16.13,Default,,0000,0000,0000,,Quando a placa é incubada à temperatura ambiente, Dialogue: 0,0:01:16.13,0:01:18.61,Default,,0000,0000,0000,,os orifícios com controle negativo ficam inalterados. Dialogue: 0,0:01:18.61,0:01:22.93,Default,,0000,0000,0000,,Os orifícios com controle positivo formam um botão visível no fundo Dialogue: 0,0:01:22.93,0:01:28.84,Default,,0000,0000,0000,,e a solução nesses orifícios passa de leitosa para translúcida. Dialogue: 0,0:01:28.84,0:01:35.22,Default,,0000,0000,0000,,Então, o que explica o aparecimento de orifícios positivos Dialogue: 0,0:01:35.22,0:01:38.17,Default,,0000,0000,0000,,e o que explica a falta de alteração nos orifícios negativos? Dialogue: 0,0:01:38.17,0:01:42.68,Default,,0000,0000,0000,,Para entender o que acontece, vamos analisar a aparência microscópica Dialogue: 0,0:01:42.68,0:01:46.27,Default,,0000,0000,0000,,dos orifícios positivos e negativos, para ver o que acontece em cada caso. Dialogue: 0,0:01:46.27,0:01:51.05,Default,,0000,0000,0000,,Quando não existem anticorpos no orifícios, as pérolas permanecem em suspensão Dialogue: 0,0:01:51.05,0:01:53.17,Default,,0000,0000,0000,,conferindo-lhe um aspecto leitoso. Dialogue: 0,0:01:53.17,0:01:59.96,Default,,0000,0000,0000,,Mas, quando está presente um anticorpo específico. há união das pérolas e forma-se um reticulado. Dialogue: 0,0:01:59.96,0:02:05.57,Default,,0000,0000,0000,,Isto faz com que as pérolas se aglutinem e formam-se grandes agregados que precipitam Dialogue: 0,0:02:05.57,0:02:07.19,Default,,0000,0000,0000,,para o fundo arredondado dos orifícios. Dialogue: 0,0:02:07.19,0:02:12.56,Default,,0000,0000,0000,,A suspensão, que era leitosa, fica translúcida pela precipitação dos complexos, Dialogue: 0,0:02:12.56,0:02:17.75,Default,,0000,0000,0000,,e os agregados formam uma pastilha ou um botão no fundo do orifício. Dialogue: 0,0:02:17.75,0:02:22.32,Default,,0000,0000,0000,,Então, há a formação de um botão no fundo dos orifícios Dialogue: 0,0:02:22.32,0:02:25.11,Default,,0000,0000,0000,,com anticorpos específicos suficientes para precipitar as pérolas. Dialogue: 0,0:02:25.11,0:02:29.86,Default,,0000,0000,0000,,Mas quando o anticorpo está muito diluído, não há precipitação. Dialogue: 0,0:02:29.86,0:02:36.86,Default,,0000,0000,0000,,Os títulos de anticorpos de um paciente são a última diluição de soro capaz de produzir precipitação. Dialogue: 0,0:02:49.67,0:02:54.55,Default,,0000,0000,0000,,Mas, como se explica a ausência de precipitação nos orifícios mais concentrados, Dialogue: 0,0:02:54.55,0:02:59.35,Default,,0000,0000,0000,,com soro com títulos mais altos, mostrados pela seta laranja? Dialogue: 0,0:02:59.35,0:03:04.19,Default,,0000,0000,0000,,Imagine um orifício que tem muito mais moléculas de anticorpo do que pérolas. Dialogue: 0,0:03:04.19,0:03:08.29,Default,,0000,0000,0000,,As pérolas vão ser totalmente revestidas por anticorpos Dialogue: 0,0:03:08.29,0:03:12.32,Default,,0000,0000,0000,,e não haverá possibilidade de reticulação e precipitação. Dialogue: 0,0:03:12.32,0:03:18.73,Default,,0000,0000,0000,,Este fenômeno, chamado de pró-zona, às vezes ocorre em casos de sífilis. Dialogue: 0,0:03:18.73,0:03:23.51,Default,,0000,0000,0000,,O teste de triagem padrão para sífilis é um ensaio de aglutinação Dialogue: 0,0:03:23.51,0:03:28.20,Default,,0000,0000,0000,,Adiciona-se soro não diluído às pérolas revestidas com o antígeno cardiolipina. Dialogue: 0,0:03:28.20,0:03:33.21,Default,,0000,0000,0000,,Na sífilis secundária, os títulos de anticorpos às vezes são tão altos Dialogue: 0,0:03:33.21,0:03:36.30,Default,,0000,0000,0000,,que o teste exibe uma pró-zona e o resultado é falso negativo. Dialogue: 0,0:03:36.30,0:03:40.87,Default,,0000,0000,0000,,Então, como podemos superar este problema potencial Dialogue: 0,0:03:40.87,0:03:42.39,Default,,0000,0000,0000,,e fazer um diagnóstico laboratorial correto? Dialogue: 0,0:03:42.39,0:03:46.61,Default,,0000,0000,0000,,Que tal diluir o soro e depois testar novamente? Dialogue: 0,0:03:46.61,0:03:51.00,Default,,0000,0000,0000,,Diluindo o anticorpo, neste caso, as quantidades de anticorpos e antígenos Dialogue: 0,0:03:51.00,0:03:53.51,Default,,0000,0000,0000,,tornam-se praticamente equivalentes. Dialogue: 0,0:03:53.51,0:03:56.67,Default,,0000,0000,0000,,Assim, existem condições para reticulação. Dialogue: 0,0:03:56.67,0:04:01.51,Default,,0000,0000,0000,,Quando ocorre a reticulação, forma-se um precipitado e desenvolve-se um botão Dialogue: 0,0:04:01.51,0:04:03.97,Default,,0000,0000,0000,,no fundo do tubo, que indica um teste positivo.