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(Translated into Brazilian Portuguese/Português by Marina S. Rodrigues) Ensaios de aglutinação têm sido usados durante décadas como um método simples para detectar substâncias antigênicas

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em amostras biológicas.

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Este vídeo tem como objetivo explicar como este método funciona na prática

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e expor suas limitações.

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O ensaio de aglutinação usa pequenas partículas, geralmente esferas de látex.

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As esferas são revestidas com um anticorpo específico contra o antígeno que você

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gostaria de detectar.

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O teste é geralmente realizado em um cartão ou lâmina, de vidro ou plástico, frequentemente com uma superfície

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preta.

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Primeiro você adiciona uma suspensão das esferas revestidas em cada um dos

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três círculos da lâmina.

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Perceba que a suspensão é suficientemente concentrada para produzir uma aparência leitosa no fundo.

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Agora você adiciona algumas gotas da amostra desconhecida que está interessado em testar.

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Mas, também será necessário usar um dos círculos para uma solução de controle negativo,

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que não contem antígenos, e outro círculo para o controle positivo, que contem o antígeno

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de interesse.

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Em seguida, a lâmina é balançada gentilmente para misturar as esferas com as soluções teste e

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as amostras contendo o antígeno de interesse começarão a aglutinar as esferas.

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Isto produzirá a aparência de grumos visíveis e a solução mudará de

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leitosa para clara e transparente.

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Esta transição deve ocorrer na área com o controle positivo.

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Se o antígeno estiver presente na amostra desconhecida, haverá formação de grumos.

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O círculo do controle negativo deve permanecer sem grumos e opaco.

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Lembre-se que as esferas estão revestidas com anticorpos específicos de forma que cada esfera

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pode se ligar a vários antígenos.

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Para que a aglutinação funcione. O antígeno de interesse deve ser capaz de se ligar a múltiplas esferas.

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Portanto, neste ensaio, os antígenos que podem ser detectados são limitados a grandes macromoléculas

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que possuem domínios antigênicos repetitivos.

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Moléculas como cápsulas microbianas, flagelos ou lipopolissacarídeos;

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Uma longa molécula repetitiva de antígeno pode ligar-se a diversas esferas e formar grumos

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ou aglutinar;

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Por isso, pequenas quantidades de antígeno que possuem vários domínios repetitivos podem

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formar grumos visíveis e serem detectadas por este teste.

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Esta é a base do teste.

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Por fim, aqui estão alguns exemplos de ensaios de aglutinação que são utilizados na prática clínica.