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Dialogue: 0,0:00:00.00,0:00:06.00,Default,,0000,0000,0000,,(Translated into Brazilian Portuguese/Português by Marina S. Rodrigues) Ensaios de aglutinação têm sido usados durante décadas como um método simples para detectar substâncias antigênicas
Dialogue: 0,0:00:06.00,0:00:07.00,Default,,0000,0000,0000,,em amostras biológicas.
Dialogue: 0,0:00:07.00,0:00:12.00,Default,,0000,0000,0000,,Este vídeo tem como objetivo explicar como este método funciona na prática
Dialogue: 0,0:00:12.00,0:00:15.00,Default,,0000,0000,0000,,e expor suas limitações.
Dialogue: 0,0:00:15.00,0:00:20.00,Default,,0000,0000,0000,,O ensaio de aglutinação usa pequenas partículas, geralmente esferas de látex.
Dialogue: 0,0:00:20.00,0:00:24.00,Default,,0000,0000,0000,,As esferas são revestidas com um anticorpo específico contra o antígeno que você
Dialogue: 0,0:00:24.00,0:00:27.00,Default,,0000,0000,0000,,gostaria de detectar.
Dialogue: 0,0:00:27.00,0:00:33.00,Default,,0000,0000,0000,,O teste é geralmente realizado em um cartão ou lâmina, de vidro ou plástico, frequentemente com uma superfície
Dialogue: 0,0:00:33.00,0:00:34.00,Default,,0000,0000,0000,,preta.
Dialogue: 0,0:00:34.00,0:00:39.00,Default,,0000,0000,0000,,Primeiro você adiciona uma suspensão das esferas revestidas em cada um dos
Dialogue: 0,0:00:39.00,0:00:41.00,Default,,0000,0000,0000,,três círculos da lâmina.
Dialogue: 0,0:00:41.00,0:00:49.00,Default,,0000,0000,0000,,Perceba que a suspensão é suficientemente concentrada para produzir uma aparência leitosa no fundo.
Dialogue: 0,0:00:49.00,0:00:53.00,Default,,0000,0000,0000,,Agora você adiciona algumas gotas da amostra desconhecida que está interessado em testar.
Dialogue: 0,0:00:53.00,0:00:59.00,Default,,0000,0000,0000,,Mas, também será necessário usar um dos círculos para uma solução de controle negativo,
Dialogue: 0,0:00:59.00,0:01:04.00,Default,,0000,0000,0000,,que não contem antígenos, e outro círculo para o controle positivo, que contem o antígeno
Dialogue: 0,0:01:04.00,0:01:12.00,Default,,0000,0000,0000,,de interesse.
Dialogue: 0,0:01:12.00,0:01:20.00,Default,,0000,0000,0000,,Em seguida, a lâmina é balançada gentilmente para misturar as esferas com as soluções teste e
Dialogue: 0,0:01:20.00,0:01:25.00,Default,,0000,0000,0000,,as amostras contendo o antígeno de interesse começarão a aglutinar as esferas.
Dialogue: 0,0:01:25.00,0:01:29.00,Default,,0000,0000,0000,,Isto produzirá a aparência de grumos visíveis e a solução mudará de
Dialogue: 0,0:01:29.00,0:01:34.00,Default,,0000,0000,0000,,leitosa para clara e transparente.
Dialogue: 0,0:01:34.00,0:01:36.00,Default,,0000,0000,0000,,Esta transição deve ocorrer na área com o controle positivo.
Dialogue: 0,0:01:36.00,0:01:41.00,Default,,0000,0000,0000,,Se o antígeno estiver presente na amostra desconhecida, haverá formação de grumos.
Dialogue: 0,0:01:41.00,0:01:47.00,Default,,0000,0000,0000,,O círculo do controle negativo deve permanecer sem grumos e opaco.
Dialogue: 0,0:01:47.00,0:01:52.00,Default,,0000,0000,0000,,Lembre-se que as esferas estão revestidas com anticorpos específicos de forma que cada esfera
Dialogue: 0,0:01:52.00,0:01:54.00,Default,,0000,0000,0000,,pode se ligar a vários antígenos.
Dialogue: 0,0:01:54.00,0:02:00.00,Default,,0000,0000,0000,,Para que a aglutinação funcione. O antígeno de interesse deve ser capaz de se ligar a múltiplas esferas.
Dialogue: 0,0:02:00.00,0:02:05.00,Default,,0000,0000,0000,,Portanto, neste ensaio, os antígenos que podem ser detectados são limitados a grandes macromoléculas
Dialogue: 0,0:02:05.00,0:02:09.00,Default,,0000,0000,0000,,que possuem domínios antigênicos repetitivos.
Dialogue: 0,0:02:09.00,0:02:15.00,Default,,0000,0000,0000,,Moléculas como cápsulas microbianas, flagelos ou lipopolissacarídeos;
Dialogue: 0,0:02:15.00,0:02:20.00,Default,,0000,0000,0000,,Uma longa molécula repetitiva de antígeno pode ligar-se a diversas esferas e formar grumos
Dialogue: 0,0:02:20.00,0:02:23.00,Default,,0000,0000,0000,,ou aglutinar;
Dialogue: 0,0:02:23.00,0:02:27.00,Default,,0000,0000,0000,,Por isso, pequenas quantidades de antígeno que possuem vários domínios repetitivos podem
Dialogue: 0,0:02:27.00,0:02:32.00,Default,,0000,0000,0000,,formar grumos visíveis e serem detectadas por este teste.
Dialogue: 0,0:02:32.00,0:02:35.00,Default,,0000,0000,0000,,Esta é a base do teste.
Dialogue: 0,0:02:35.00,0:02:39.00,Default,,0000,0000,0000,,Por fim, aqui estão alguns exemplos de ensaios de aglutinação que são utilizados na prática clínica.