WEBVTT 00:00:00.359 --> 00:00:06.001 (French translation by Samuel Scherber) On utilisait pendant des décennies les tests d'agglutination comme une méthode simple pour détecter les substances antigéniques 00:00:06.001 --> 00:00:07.091 dans les échantillons biologiques. 00:00:07.091 --> 00:00:12.559 Le but de cette vidéo est de montrer comment fonctionne cette méthode dans la pratique et d'en exposer 00:00:12.559 --> 00:00:15.699 ses limites. 00:00:15.699 --> 00:00:20.002 Le test d'agglutination utilise de particules minuscules, ce qui sont le plus souvent des billes de latex. 00:00:20.002 --> 00:00:24.059 Ces perles sont recouvertes d'un anticorps spécifique contre l'antigène que l'on souhaite 00:00:24.059 --> 00:00:27.051 détecter. 00:00:27.051 --> 00:00:33.053 Normalement, on effectue ce test sur une carte, en verre ou en plastique porte-object, et plus souvent sur une 00:00:33.053 --> 00:00:34.097 surface noire. 00:00:34.097 --> 00:00:39.093 D'abord, on ajoute à chacune des trois zones encerclées une suspension de billes de latex recouvertes d'anticorps spécifiques 00:00:39.093 --> 00:00:41.041 sur le porte-objet. 00:00:41.041 --> 00:00:49.075 Notons que la suspension est suffisamment concentrée pour produire une apparence laiteuse sur le fond. 00:00:49.075 --> 00:00:53.061 Ensuite, vous ajoutez quelques gouttes de l'échantillon inconnue d'intérêt. 00:00:53.061 --> 00:00:59.001 Mais, vous aurez également besoin d'utiliser une des zones encerclées comme contrôle négatif et donc qui 00:00:59.001 --> 00:01:04.011 ne contient pas d'antigène; aussi vous en aurez besoin d'une autre pour une solution témoin positif qui contient de l'antigène 00:01:04.011 --> 00:01:12.092 d'intérêt. 00:01:12.092 --> 00:01:20.002 Après, on agite le porte-objet afin de mélanger les billes avec les solutions de test, et qui permette alors 00:01:20.002 --> 00:01:25.058 aux échantillons contenant l'antigène d'intérêt d'agglutiner avec les perles. 00:01:25.058 --> 00:01:29.079 Ceci va produire par conséquence l'apparition d'agglutination visible et la solution elle-même se développera 00:01:29.079 --> 00:01:34.003 une apparence venant de laiteuse au clair et transparent. 00:01:34.003 --> 00:01:36.979 On doit observer cette transformation dans la région avec le contrôle positif. 00:01:36.979 --> 00:01:41.093 Si l'antigène est présent dans l'échantillon inconnu, il se formera aussi des agglutinations. 00:01:41.093 --> 00:01:47.053 Le cercle de contrôle négatif doit rester non-agglutiné et opaque. 00:01:47.053 --> 00:01:52.549 Rappelons que les billes de latex sont recouvertes par un anticorps spécifique de sorte que chaque bourrelet peut 00:01:52.549 --> 00:01:54.084 se lier aux plusieurs antigènes. 00:01:54.084 --> 00:02:00.006 Pour qu'il y ait de l'agglutination, l'antigène d'intérêt doit également être capable de se lier à des billes multiples. 00:02:00.006 --> 00:02:05.939 Par conséquent, dans ce test, les antigènes qui peuvent être détectés sont limités aux grosses macromolécules 00:02:05.939 --> 00:02:09.058 qui possèdent des domaines antigéniques répétitifs, 00:02:09.058 --> 00:02:15.459 par exemple, les capsules microbiennes, les flagelles, ou les lipopolysaccharides. 00:02:15.459 --> 00:02:20.001 Une longue molécule d'antigène avec plusieurs domaines de répétition peut ensuite s'associer aux plusieurs perles, provoquant 00:02:20.001 --> 00:02:23.009 l'agglutination. 00:02:23.009 --> 00:02:27.959 Ainsi, même des quantités minuscules d'antigènes qui de moins possèdent plusieurs domaines antigéniques répétées peuvent 00:02:27.959 --> 00:02:32.489 provoquer la formation des amas visibles et par conséquent, leur détection par ce test. 00:02:32.489 --> 00:02:35.084 Ceci est la base du test. 00:02:35.084 --> 00:02:39.084 Enfin, voici quelques exemples de tests d'agglutination qui sont utilisés dans la pratique clinique.