1 00:00:00,359 --> 00:00:06,001 (French translation by Samuel Scherber) On utilisait pendant des décennies les tests d'agglutination comme une méthode simple pour détecter les substances antigéniques 2 00:00:06,001 --> 00:00:07,091 dans les échantillons biologiques. 3 00:00:07,091 --> 00:00:12,559 Le but de cette vidéo est de montrer comment fonctionne cette méthode dans la pratique et d'en exposer 4 00:00:12,559 --> 00:00:15,699 ses limites. 5 00:00:15,699 --> 00:00:20,002 Le test d'agglutination utilise de particules minuscules, ce qui sont le plus souvent des billes de latex. 6 00:00:20,002 --> 00:00:24,059 Ces perles sont recouvertes d'un anticorps spécifique contre l'antigène que l'on souhaite 7 00:00:24,059 --> 00:00:27,051 détecter. 8 00:00:27,051 --> 00:00:33,053 Normalement, on effectue ce test sur une carte, en verre ou en plastique porte-object, et plus souvent sur une 9 00:00:33,053 --> 00:00:34,097 surface noire. 10 00:00:34,097 --> 00:00:39,093 D'abord, on ajoute à chacune des trois zones encerclées une suspension de billes de latex recouvertes d'anticorps spécifiques 11 00:00:39,093 --> 00:00:41,041 sur le porte-objet. 12 00:00:41,041 --> 00:00:49,075 Notons que la suspension est suffisamment concentrée pour produire une apparence laiteuse sur le fond. 13 00:00:49,075 --> 00:00:53,061 Ensuite, vous ajoutez quelques gouttes de l'échantillon inconnue d'intérêt. 14 00:00:53,061 --> 00:00:59,001 Mais, vous aurez également besoin d'utiliser une des zones encerclées comme contrôle négatif et donc qui 15 00:00:59,001 --> 00:01:04,011 ne contient pas d'antigène; aussi vous en aurez besoin d'une autre pour une solution témoin positif qui contient de l'antigène 16 00:01:04,011 --> 00:01:12,092 d'intérêt. 17 00:01:12,092 --> 00:01:20,002 Après, on agite le porte-objet afin de mélanger les billes avec les solutions de test, et qui permette alors 18 00:01:20,002 --> 00:01:25,058 aux échantillons contenant l'antigène d'intérêt d'agglutiner avec les perles. 19 00:01:25,058 --> 00:01:29,079 Ceci va produire par conséquence l'apparition d'agglutination visible et la solution elle-même se développera 20 00:01:29,079 --> 00:01:34,003 une apparence venant de laiteuse au clair et transparent. 21 00:01:34,003 --> 00:01:36,979 On doit observer cette transformation dans la région avec le contrôle positif. 22 00:01:36,979 --> 00:01:41,093 Si l'antigène est présent dans l'échantillon inconnu, il se formera aussi des agglutinations. 23 00:01:41,093 --> 00:01:47,053 Le cercle de contrôle négatif doit rester non-agglutiné et opaque. 24 00:01:47,053 --> 00:01:52,549 Rappelons que les billes de latex sont recouvertes par un anticorps spécifique de sorte que chaque bourrelet peut 25 00:01:52,549 --> 00:01:54,084 se lier aux plusieurs antigènes. 26 00:01:54,084 --> 00:02:00,006 Pour qu'il y ait de l'agglutination, l'antigène d'intérêt doit également être capable de se lier à des billes multiples. 27 00:02:00,006 --> 00:02:05,939 Par conséquent, dans ce test, les antigènes qui peuvent être détectés sont limités aux grosses macromolécules 28 00:02:05,939 --> 00:02:09,058 qui possèdent des domaines antigéniques répétitifs, 29 00:02:09,058 --> 00:02:15,459 par exemple, les capsules microbiennes, les flagelles, ou les lipopolysaccharides. 30 00:02:15,459 --> 00:02:20,001 Une longue molécule d'antigène avec plusieurs domaines de répétition peut ensuite s'associer aux plusieurs perles, provoquant 31 00:02:20,001 --> 00:02:23,009 l'agglutination. 32 00:02:23,009 --> 00:02:27,959 Ainsi, même des quantités minuscules d'antigènes qui de moins possèdent plusieurs domaines antigéniques répétées peuvent 33 00:02:27,959 --> 00:02:32,489 provoquer la formation des amas visibles et par conséquent, leur détection par ce test. 34 00:02:32,489 --> 00:02:35,084 Ceci est la base du test. 35 00:02:35,084 --> 00:02:39,084 Enfin, voici quelques exemples de tests d'agglutination qui sont utilisés dans la pratique clinique.