(Spanish/Español translation by Juliana Salomón, BA, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan.) Los ensayos de aglutinación se han utilizado durante décadas como un método sencillo para detectar sustancias antigénicas...
en muestras biológicas.
El propósito de este video es explicar cómo funciona este método en la práctica y revelar...
sus limitaciones.
El ensayo de aglutinación utiliza partículas diminutas, en general, perlas de látex.
Las perlas están recubiertas con un anticuerpo específico contra el antígeno que se desea...
detectar.
El examen se realiza generalmente en una tarjeta o un portaobjetos de vidrio o plástico, a menudo con una superficie...
negra.
En primer lugar se agrega una suspensión de las perlas de látex recubiertas a cada una de las tres áreas rodeadas...
en el portaobjetos.
Tenga en cuenta que la suspensión se concentra lo suficiente como para tener una apariencia lechosa en el fondo.
Ahora se añade unas gotas de la muestra desconocida que se está estudiando.
También tendrá que utilizar uno de los círculos para el control negativo que...
no contenga antígenos, y otro para el control positivo que sí contenga el antígeno...
de interés.
A continuación, el portaobjetos se sacude suavemente o se arremolina para mezclar las perlas con las soluciones de ensayo, y...
las muestras que contienen el antígeno de interés comienzan a aglutinar las perlas.
Esto producirá la formación de grumos visibles y la solución pasará...
de un aspecto lechoso a uno claro y transparente.
Esta transición debe ocurrir en el área con el control positivo.
Si el antígeno está presente en la muestra desconocida entonces se forman grumos.
El control negativo debe permanecer sin grumos y opaco.
Recordemos que las perlas de látex se recubren con un anticuerpo específico de modo que cada perla puede...
unir numerosos antígenos
Para que la aglutinación funcione, el antígeno de interés también debe ser capaz de unirse a muchas perlas.
Por lo tanto, en este ensayo, los antígenos que pueden ser detectados se limitan a macromoléculas grandes...
que tienen dominios antigénicos repetitivos.
Moléculas como cápsulas microbianas, flagelos o lipopolisacáridos.
Una larga molécula repetidora de antígenos se puede conectar a varias perlas haciendo que se agrupen...
o se aglutinen.
Así que incluso cantidades muy pequeñas de antígenos que tienen muchos dominios antigénicos repetitivos pueden...
formar grumos visibles y ser detectados por este ensayo.
Esta es la base del ensayo.
Finalmente, aquí hay algunos ejemplos de ensayos de aglutinación que se utilizan en la práctica clínica.