1 00:00:00,359 --> 00:00:06,001 (Spanish/Español translation by Juliana Salomón, BA, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan.) Los ensayos de aglutinación se han utilizado durante décadas como un método sencillo para detectar sustancias antigénicas... 2 00:00:06,001 --> 00:00:07,091 en muestras biológicas. 3 00:00:07,091 --> 00:00:12,559 El propósito de este video es explicar cómo funciona este método en la práctica y revelar... 4 00:00:12,559 --> 00:00:15,699 sus limitaciones. 5 00:00:15,699 --> 00:00:20,002 El ensayo de aglutinación utiliza partículas diminutas, en general, perlas de látex. 6 00:00:20,002 --> 00:00:24,059 Las perlas están recubiertas con un anticuerpo específico contra el antígeno que se desea... 7 00:00:24,059 --> 00:00:27,051 detectar. 8 00:00:27,051 --> 00:00:33,053 El examen se realiza generalmente en una tarjeta o un portaobjetos de vidrio o plástico, a menudo con una superficie... 9 00:00:33,053 --> 00:00:34,097 negra. 10 00:00:34,097 --> 00:00:39,093 En primer lugar se agrega una suspensión de las perlas de látex recubiertas a cada una de las tres áreas rodeadas... 11 00:00:39,093 --> 00:00:41,041 en el portaobjetos. 12 00:00:41,041 --> 00:00:49,075 Tenga en cuenta que la suspensión se concentra lo suficiente como para tener una apariencia lechosa en el fondo. 13 00:00:49,075 --> 00:00:53,061 Ahora se añade unas gotas de la muestra desconocida que se está estudiando. 14 00:00:53,061 --> 00:00:59,001 También tendrá que utilizar uno de los círculos para el control negativo que... 15 00:00:59,001 --> 00:01:04,011 no contenga antígenos, y otro para el control positivo que sí contenga el antígeno... 16 00:01:04,011 --> 00:01:12,092 de interés. 17 00:01:12,092 --> 00:01:20,002 A continuación, el portaobjetos se sacude suavemente o se arremolina para mezclar las perlas con las soluciones de ensayo, y... 18 00:01:20,002 --> 00:01:25,058 las muestras que contienen el antígeno de interés comienzan a aglutinar las perlas. 19 00:01:25,058 --> 00:01:29,079 Esto producirá la formación de grumos visibles y la solución pasará... 20 00:01:29,079 --> 00:01:34,003 de un aspecto lechoso a uno claro y transparente. 21 00:01:34,003 --> 00:01:36,979 Esta transición debe ocurrir en el área con el control positivo. 22 00:01:36,979 --> 00:01:41,093 Si el antígeno está presente en la muestra desconocida entonces se forman grumos. 23 00:01:41,093 --> 00:01:47,053 El control negativo debe permanecer sin grumos y opaco. 24 00:01:47,053 --> 00:01:52,549 Recordemos que las perlas de látex se recubren con un anticuerpo específico de modo que cada perla puede... 25 00:01:52,549 --> 00:01:54,084 unir numerosos antígenos 26 00:01:54,084 --> 00:02:00,006 Para que la aglutinación funcione, el antígeno de interés también debe ser capaz de unirse a muchas perlas. 27 00:02:00,006 --> 00:02:05,939 Por lo tanto, en este ensayo, los antígenos que pueden ser detectados se limitan a macromoléculas grandes... 28 00:02:05,939 --> 00:02:09,058 que tienen dominios antigénicos repetitivos. 29 00:02:09,058 --> 00:02:15,459 Moléculas como cápsulas microbianas, flagelos o lipopolisacáridos. 30 00:02:15,459 --> 00:02:20,001 Una larga molécula repetidora de antígenos se puede conectar a varias perlas haciendo que se agrupen... 31 00:02:20,001 --> 00:02:23,009 o se aglutinen. 32 00:02:23,009 --> 00:02:27,959 Así que incluso cantidades muy pequeñas de antígenos que tienen muchos dominios antigénicos repetitivos pueden... 33 00:02:27,959 --> 00:02:32,489 formar grumos visibles y ser detectados por este ensayo. 34 00:02:32,489 --> 00:02:35,084 Esta es la base del ensayo. 35 00:02:35,084 --> 00:02:39,084 Finalmente, aquí hay algunos ejemplos de ensayos de aglutinación que se utilizan en la práctica clínica.