WEBVTT 00:00:00.250 --> 00:00:05.080 (Portuguese/ Português translation by Ana Julia Perrotti-Garcia, FFLCH USP SP, Freelance Translator & Interpreter) Este programa irá ilustrar a forma como o processo de coloração de Gram é capaz de diferenciar as bactérias 00:00:05.080 --> 00:00:09.480 gram-positivas e gram-negativas, representando o processo de coloração 00:00:09.480 --> 00:00:10.880 em nível ultra-estrutural. 00:00:10.880 --> 00:00:15.589 Esta animação é uma, de um série de duas, que mostra a coloração de bactérias gram-positivas 00:00:15.589 --> 00:00:21.500 com a representação esquemática da principais estruturas da superfície bacteriana. 00:00:21.500 --> 00:00:25.650 O círculo no canto inferior direito mostra a aparência microscópica das bactérias, 00:00:25.650 --> 00:00:29.880 se fossem examinadas durante cada etapa do processo de coloração. 00:00:29.880 --> 00:00:35.340 Sem a coloração, as bactérias ficariam transparentes e invisíveis ao exame microscópico. 00:00:35.340 --> 00:00:39.829 Após fixar a lâmina com calor, aplica-se cristal violeta durante um minuto e, em seguida, 00:00:39.829 --> 00:00:41.140 a lâmina é lavada. 00:00:41.140 --> 00:00:45.930 O corante pigmenta a parede celular bacteriana em azul e as bactérias ficam azuis 00:00:45.930 --> 00:00:49.719 se examinadas ao microscópio neste ponto do procedimento. 00:00:49.719 --> 00:00:55.219 Em seguida, aplica-se solução de iodo sobre a lâmina por um minuto, lavou-se novamente. 00:00:55.219 --> 00:00:59.399 Durante esta etapa, o cristal violeta e o iodo combinam-se para formar um complexo grande 00:00:59.399 --> 00:01:01.090 no interior das camadas da parede celular. 00:01:01.090 --> 00:01:06.320 Microscopicamente, as bactérias têm cor azul escura ou preta após esta etapa. 00:01:06.320 --> 00:01:11.040 A lâmina é agora enxaguada com um agente descolorante, uma solução de álcool e acetona. 00:01:11.040 --> 00:01:15.860 Mas, os complexos de iodo/cristal violeta permanecem nas camadas espessas e tortuosas 00:01:15.860 --> 00:01:21.530 da parede celular das bactérias gram-positivas e os microorganismos mantêm a cor azul escura. 00:01:21.530 --> 00:01:26.360 POr fim, a lâmina é contra-corada com vermelho neutro ou safranina por um minuto, 00:01:26.360 --> 00:01:27.970 sendo lavada novamente. 00:01:27.970 --> 00:01:33.119 O corante vermelho também cora as bactérias, mas a cor vermelha não é aparente 00:01:33.119 --> 00:01:38.530 devido ao corante azul escuro persistente que domina a aparência microscópica das bactérias. 00:01:38.530 --> 00:01:44.420 Assim, pela complexa estrutura multicamadas da parede celular das bactérias gram-positivas, 00:01:44.420 --> 00:01:47.729 elas aparecem coradas em azul escuro ou preto ao microscópio após esta coloração.